Javascript enfim nan navigatè w la kounye a. Gen kèk fonksyonalite sou sit entènèt sa a ki p ap fonksyone lè Javascript enfim.
Enskri avèk detay espesifik ou yo ak medikaman espesifik ki enterese w la epi n ap mete enfòmasyon ou bay yo an kontak ak atik ki nan baz done nou an epi n ap voye yon kopi PDF ba ou pa imèl imedyatman.
Granul Ban-Lan-Gen diminye kolit kwonik rekiran pwovoke pa dekstran sodyòm silfat nan sourit yo lè yo modifye mikwobyota entesten an epi retabli pwodiksyon SCFA entesten ki sòti nan GLP-1.
Jiao Peng,1-3,*Li Xi,4,*Zheng Lin,3,5 Duan Lifang,1 Gao Zhengxian,2,5 Diehu,1 Li Jie,6 Li Xiaofeng,6 Shen Xiangchun,5 Xiao Haitao21Depatman Famasi Lopital Inivèsite Pekin Shenzhen, Shenzhen, Repiblik Pèp la nan Lachin; 2Sant Syans Sante Inivèsite Shenzhen Lekòl Famasi, Shenzhen, Repiblik Pèp la nan Lachin; 3Inivèsite Medikal Guizhou Sant Rechèch Teknoloji Jeni pou Medsin Etnik ak Devlopman ak Aplikasyon Medsin Tradisyonèl Chinwa Ministè Edikasyon, Laboratwa Kle Pwovens Guizhou pou Famasi, Inivèsite Medikal Guizhou, Guiyang, Repiblik Pèp la nan Lachin; 4 Depatman Gastroenteroloji, Lopital Inivèsite Pekin Shenzhen, Shenzhen, Repiblik Pèp la nan Lachin; 5 Lekòl Famasi, Inivèsite Medikal Guizhou, Laboratwa Kle Eta pou Fonksyon ak Aplikasyon Plant Medikal, Guiyang; 6 Depatman Medsin Laboratwa, Lopital Inivèsite Peking Shenzhen, Shenzhen, Lachin [email protected] Shen Xiangchun, Lekòl Famasi, Inivèsite Medikal Guizhou, Guizhou, Repiblik Pèp la nan Lachin, 550004, Imèl [email protected] Objektif: Terapi ki baze sou GLP-1 se yon nouvo opsyon tretman pou maladi enflamatwa entesten. Granul Ban-Lan-Gen (BLG) se yon fòmilasyon antiviral MTC li te ye ki montre yon aktivite anti-enflamatwa potansyèl nan tretman divès kondisyon enflamatwa. Sepandan, efè anti-enflamatwa li sou kolit ak mekanis aksyon li yo toujou pa klè. METÒD: Pou etabli kolit kwonik rekiran pwovoke pa dekstran silfat sodyòm (DSS) nan sourit. Endis aktivite maladi, makè istolojik blesi, ak nivo sitokin pro-enflamatwa yo te fèt pou evalye efè pwoteksyon BLG. Efè BLG sou mikwobyota entesten an ak trip yo te karakterize pa nivo GLP-1 serik ak ekspresyon Gcg kolonik, GPR41, ak GRP43, konpozisyon mikwobyota entesten, nivo SCFA fekal, ak liberasyon GLP-1 nan sistèm prensipal la. Selil epitelyal kolonik sourit pwodiksyon GLP-1 sòti nan SCFA. Rezilta yo: Tretman BLG a te siyifikativman diminye pèt pwa kò, DAI, rakoursisman kolon, domaj tisi kolon, ak nivo sitokin proenflamatwa TNF-α, IL-1β, ak IL-6 nan tisi kolon an. Anplis de sa, tretman BLG a ka siyifikativman retabli ekspresyon Gcg kolonik, GPR41 ak GRP43 ak nivo GLP-1 serik nan sourit kolit yo, epi lè li ogmante bakteri ki pwodui SCFA tankou Akkermansia ak Prevotellaceae_UCG-001, epi li diminye abondans bakteri tankou Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas ak Oscillibacter. Anplis de sa, tretman BLG a ka siyifikativman ogmante nivo SCFA nan poupou sourit kolit yo. An menm tan, eksperyans in vitro yo te montre tou ke ekstrè fekal sourit trete ak BLG yo ka anpil estimile ti selil epitelyal kolonik prensipal Murine yo sekrete GLP-1. Konklizyon: Rezilta sa yo sijere ke BLG gen yon efè anti-kolit. BLG gen potansyèl pou devlope kòm yon terapi, omwen an pati lè li modifye mikwobyota entesten an epi li restore pwodiksyon GLP-1 ki sòti nan SCFA entesten an. Medikaman pwomèt pou kolit kwonik rekiran. Mo kle: kolit, granules Ban-Lan-Gen, mikwobyota entesten, asid gra chèn kout, GLP-1.
Kolit ilsèratif (KU) se yon maladi enflamatwa alontèm nan kolon an ak rektòm nan ki karakterize pa dyare ki repete, doulè nan vant, pèdi pwa, ak poupou san ki gen mukopurulan.1 Dènyèman, prevalans KU a ap ogmante nan peyi ki te gen ti ensidans anvan, tankou Lachin, ak popilarite k ap ogmante nan fòm vi oksidantal yo.2 Ogmantasyon sa a poze gwo pwoblèm pou sante piblik epi li gen gwo konsekans pou kapasite pasyan yo pou travay ak kalite lavi. Li enpòtan pou note ke patogenez KU a rete lajman enkoni, men jeneralman yo aksepte ke jenetik, faktè anviwònman, mikwobyota entesten an, ak sistèm iminitè a tout kontribye nan devlopman KU.3 Menm kounye a, pa gen okenn gerizon pou KU, epi objektif tretman an se klinikman pou kontwole sentòm klinik yo, pwovoke ak kenbe remisyon, ankouraje gerizon mikez, epi diminye repetition. Tretman klasik yo enkli aminosalisilat, kortikosteroyid, imunosupresè, ak byolojik. Sepandan, medikaman sa yo pa ka reyalize efè yo vle a akòz divès efè segondè yo.4 Dènyèman, anpil etid ka yo montre ke medikaman tradisyonèl Chinwa (MTC) te montre yon gwo potansyèl pou ede pou soulaje ulcero-kuit ak yon toksisite ki ba, sa ki sijere ke devlopman nouvo terapi MTC se yon estrateji tretman pwomèt pou ulcero-kuit.5-7
Granul Banlangen (BLG) se yon preparasyon medikaman tradisyonèl Chinwa ki fèt ak ekstrè dlo rasin Banlangen.8 Anplis efikasite antiviral li, BLG montre yon potansyèl aktivite anti-enflamatwa nan tretman divès kondisyon enflamatwa.9,10 Anplis de sa, yo te izole epi idantifye glukozinolat (R,S-goitrin, progoitrin, epiprorubin ak glukozid nan ekstrè akeuz Radix isatidis) ak nikleozid (ipoksantin, adenozin, uridin ak guanosin) ak alkaloid endigo tankou endigo ak endirubin.11,12 Etid anvan yo byen dokimante ke konpoze adenozin, uridin ak endirubin montre efè anti-kolit pisan nan diferan modèl bèt ki gen kolit.13-17 Sepandan, pa gen okenn etid ki baze sou prèv ki te fèt pou evalye efikasite BLG nan kolit. Nan etid sa a, nou te envestige efè pwoteksyon BLG sou kolit kwonik rekiran pwovoke pa dekstran silfat sodyòm (DSS) nan sourit C57BL/6 epi nou te jwenn ke Administrasyon oral BLG te siyifikativman atenye enflamasyon kolon kwonik rekiran pwovoke pa DSS nan sourit. Mekanis regilasyon li yo asosye avèk modilasyon mikwobyota entesten an ak restorasyon pwodiksyon peptide-1 ki sanble ak glikagon (GLP-1) ki sòti nan trip la.
Granul BLG yo (san sik, Z11020357 apwouve pa NMPA; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Beijing, Lachin; nimewo lo: 20110966) te achte nan famasi. DSS (Pwa Molekilè: 36,000–50,000 Daltons) te achte nan MP Biologicals (Santa Ana, Etazini). Sulfasalazin (SASP) (pite ≥ 98%), ematoksilin ak eozin te achte nan Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Etazini). Twous tès sourit TNF-α, IL-1β ak IL-6 luminex Elisa te achte nan R&D systems (Minneapolis, MN, Etazini). Asid asetik, asid propionik, ak asid butirik te achte nan Aladdin Industries (Shanghai, Lachin). Asid 2-etilbutirik te achte nan Merck KGaA (Darmstadt, Almay).
Yo te achte sourit gason C57BL/6 ki gen 6-8 semèn (pwa kò 18-22 g) nan men Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Beijing, Lachin) epi yo te mete yo nan yon anviwònman 22 ± 2 °C ak yon sik limyè/fènwa 12 èdtan. Yo te bay sourit yo yon rejim alimantè wonjè estanda ak aksè lib a dlo pou bwè pandan yon semèn pou yo te ka abitye ak nouvo anviwònman an. Apre sa, yo te divize sourit yo owaza an kat gwoup: gwoup kontwòl, gwoup modèl DSS, gwoup trete ak SASP (200 mg/kg, oral) ak gwoup trete ak BLG (1 g/kg, oral). Jan yo montre nan Figi 1A, dapre etid anvan nou an, yo te pwovoke kolit kwonik rekiran eksperimantal nan sourit pa twa sik 1.8% DSS pandan 5 jou, ki te swiv pa dlo distile pandan 7 jou, dapre etid anvan nou an.18 Sourit nan gwoup trete ak SASP ak BLG yo te trete ak SASP ak BLG, respektivman, chak jou apati jou 0. Dapre eksperyans preliminè yo, dòz la Yo te fikse BLG a 1 g/kg. Pandansetan, yo te fikse dòz SASP a 200 mg/Kg dapre literati a.4 Gwoup kontwòl la ak gwoup modèl DSS la te resevwa menm volim dlo a pandan tout eksperyans lan.
Figi 1 BLG amelyore kolit kwonik rekiran pwovoke pa DSS nan sourit. (A) Desen eksperimantal pou kolit kwonik rekiran ak tretman, (B) chanjman nan pwa kò a, (C) nòt endèks aktivite maladi a (DAI), (D) longè kolon an, (E) imaj reprezantatif kolon an, (F) koloran H&E Kolon an (agrandisman, ×100) ak (G) nòt istolojik. Done yo prezante kòm mwayèn ± SEM (n = 6). ##p < 0.01 oubyen ###p < 0.001 vs gwoup kontwòl (Con); *p < 0.05 oubyen **p < 0.01 oubyen ***p < 0.001 vs gwoup DSS la.
Yo te anrejistre pwa kò a, konsistans poupou a, ak senyen nan rèktòm chak jou. Yo te detèmine endèks aktivite maladi a (DAI) lè yo te konbine nòt pwa kò a, konsistans poupou a, ak senyen nan rèktòm jan sa te dekri deja.19 Nan fen eksperyans lan, yo te fè eutanazi tout sourit yo epi yo te kolekte san, poupou ak kolon pou plis eksperyans.
Yo te fikse tisi kolon an ak fòmalin epi yo te mete l nan parafin. Yo te fè seksyon 5 mikron epi yo te kolore yo ak ematoksilin-eozin (H&E), answit yo te fèmen epi yo te make yo jan yo te dekri deja.19
Yo te ekstrè ARN total tisi kolon an avèk reyaktif Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA), epi apre sa yo te fè ekstraksyon ADNc avèk transkriptaz envès (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Japon). Yo te fè PCR kantitatif la avèk yon sistèm PCR an tan reyèl avèk SYBR Green Master (Roche, Basel, Swis). Yo te normalize transkripsyon jèn sib yo an β-aktin epi yo te analize done yo avèk metòd 2-ΔΔCT la. Sekans amorseur jèn yo montre nan Tablo 1.
Yo te fè izolasyon ak kilti selil epitelyal kolonik prensipal sourit yo jan yo te dekri deja.20 An brèf, yo te premye koupe kolon sourit ki gen 6-8 semèn apre sakrifis pa dislokasyon nan kòl matris, answit yo te louvri longitudinalman, trete ak Solisyon Sale Balanse Hanks (HBSS, san kalsyòm ak mayezyòm) epi koupe an ti moso 0.5-1 mm. Apre sa, yo te dijere tisi yo ak 0.4 mg/mL kolagenaz XI (Sigma, Poole, UK) nan mwayen DMEM gratis epi santrifije a 300 xg pandan 5 minit nan tanperati chanm. Yo te resispann grenn nan nan mwayen DMEM (konplemante ak 10% serom fetal bovin, 100 Inite/mL penisilin, ak 100 µg/mL streptomisin) a 37 °C epi pase nan yon may nilon (gwosè pò ~250 µm). Yo te mete alikòt selil epitelyal kolonik nan plat ki gen fon an vè epi yo te enkube yo ak asid asetik, asid propionik, asid butirik, ak ekstrè fekal sourit pou... 2 èdtan nan 37°C, 5% CO2.
Yo te omojene tisi kolon an avèk PBS, epi yo te detekte nivo sitokin IL-6, TNF-α ak IL-1β nan tisi kolon an lè l sèvi avèk twous tès ELISA luminex (R&D systems, Minneapolis, MN, USA). Menm jan an tou, yo te detèmine nivo GLP-1 nan serom ak mwayen kilti selil epitelyal kolonik murin prensipal yo avèk yon twous ELISA (Bioswamp, Wuhan, Lachin) dapre enstriksyon manifakti a.
Yo te ekstrè ADN total ki soti nan poupou a avèk yon twous ekstraksyon ADN (Tiangen, Lachin). Yo te mezire kalite ak kantite ADN nan rapò 260 nm/280 nm ak 260 nm/230 nm, respektivman. Apre sa, lè yo te itilize chak ADN ekstrè kòm yon modèl, yo te itilize primè espesifik 338F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) ak 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) pou anplifye rejyon V3-V4 jèn 16S rRNA nan diferan rejyon yo. Yo te pirifye pwodwi PCR yo lè l sèvi avèk Twous Ekstraksyon Jèl QIAquick (QIAGEN, Almay), yo te kantifye yo pa PCR an tan reyèl, epi yo te sekansye yo lè l sèvi avèk platfòm sekansaj IlluminaMiseq PE300 (Illumina Inc., CA, USA). Pou analiz byoenformatik, yo te fè tretman done yo apre pwotokòl yo te rapòte deja.21,22 An brèf, sèvi ak Cutadapt (V1.9.1) pou filtre fichye eksprime kri yo. Yo te gwoupe OTU yo lè l sèvi avèk UPARSE. (vèsyon 7.0.1001) avèk yon papòt similarite 97%, epi yo te itilize UCHIME pou retire sekans kimerik yo. Analiz konpozisyon kominote a ak klasifikasyon yo te fèt lè l sèvi avèk klasifikatè RDP a (http://rdp.cme.msu.edu/) ki baze sou baz done jèn ARN ribozomal SILVA a.
Yo te mezire nivo asid gra ki gen chèn kout (asid asetik, asid propionik, ak asid butirik) jan Tao et al. te dekri sa deja, avèk kèk modifikasyon.23 An brèf, yo te premye sispann 100 mg poupou nan 0.4 mL dlo deyonize, apre sa yo te ajoute 0.1 mL asid silfirik 50% ak 0.5 mL asid 2-etilbutirik (estanda entèn), answit yo te omojeneize epi chofe a 4°C. Santrifije a 12,000 rpm pandan 15 minit nan C. Yo te ekstrè sipènatant la ak 0.5 mL etè epi enjekte li nan GC a pou analiz. Pou analiz kromatografi gaz (GC), yo te analize echantiyon yo lè l sèvi avèk yon kromatograf gaz GC-2010 Plus (Shimadzu, Inc.) ekipe ak yon detektè iyonizasyon flanm dife (FID). Yo te reyalize separasyon an lè l sèvi avèk yon kolòn ZKAT-624, 30 m × 0.53 mm × 0.3 μm (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., Lachin). Yo te jwenn done yo lè l sèvi avèk lojisyèl solisyon GC (Shimadzu, Inc.). Rapò divizyon an te 10:1, gaz vektè a te nitwojèn, epi to koule a te 6 mL/min. Volim enjeksyon an te 1 μL. Tanperati enjektè a ak detektè a te 300°C. Yo te kenbe tanperati fou a nan 140°C pandan 13.5 minit, answit ogmante a 250°C nan yon vitès 120°C/min; yo te kenbe tanperati a pandan 5 minit.
Done yo prezante kòm mwayèn ± erè estanda mwayèn nan (SEM). Yo te evalye siyifikasyon done yo pa ANOVA yon sèl chemen ki te swiv pa tès miltip Duncan an. Yo te itilize lojisyèl GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA) pou tout kalkil yo epi yo te konsidere p < 0.05 kòm estatistikman siyifikatif.
Li byen koni ke kolit rekiran kwonik se yon maladi kolit kwonik ki rekiran ak doulè nan vant grav, dyare ak senyen. Se poutèt sa, yo te etabli kolit rekiran kwonik ki pwovoke pa DSS nan sourit pou evalye efikasite anti-kolit BLG a (Fig. 1A). Konpare ak gwoup kontwòl la, sourit nan gwoup modèl DSS la te gen yon pwa kò redwi anpil ak yon DAI ki pi wo, epi chanjman sa yo te ranvèse anpil apre 24 jou tretman BLG (Figi 1B ak C). Rakoursi kolon an se yon mak enpòtan nan UC. Jan yo montre nan Figi 1D ak E, longè kolon sourit ki te resevwa DSS yo te siyifikativman pi kout, men tretman BLG te soulaje yo. Apre sa, yo te fè analiz istopatolojik pou evalye enflamasyon kolon an. Imaj ki te kolore ak H&E ak nòt patolojik yo te montre ke administrasyon DSS te deranje anpil achitekti kolon an epi li te lakòz destriksyon kript, tandiske tretman BLG te siyifikativman redwi destriksyon kript ak nòt patolojik yo (Figi 1F ak G). Li enpòtan pou note ke efè pwoteksyon BLG nan yon dòz 1 g/Kg te konparab ak sa ki nan SASP nan yon dòz 200 mg/Kg. Ansanm, rezilta sa yo sijere ke BLG efikas nan diminye gravite kolit kwonik rekiran pwovoke pa DSS nan sourit.
TNF-α, IL-1β ak IL-6 se makè enflamatwa enpòtan nan enflamasyon kolonik. Jan yo montre nan Figi 2A, DSS te pwovoke yon ogmantasyon siyifikatif nan ekspresyon jèn TNF-α, IL-1β ak IL-6 nan kolon an konpare ak gwoup kontwòl la. Administrasyon BLG ka siyifikativman ranvèse chanjman sa yo ki medyatè pa DSS. Apre sa, nou te itilize ELISA pou detèmine nivo sitokin enflamatwa TNF-α, IL-1β, ak IL-6 nan tisi kolon an. Rezilta yo te montre tou ke nivo kolonik TNF-α, IL-1β, ak IL-6 te siyifikativman ogmante nan sourit trete ak DSS, alòske tretman BLG te soulaje ogmantasyon sa yo (Figi 2B).
Figi 2 BLG inibi ekspresyon jèn ak pwodiksyon sitokin proenflamatwa TNF-α, IL-1β ak IL-6 nan kolon sourit trete ak DSS. (A) Ekspresyon jèn kolonik TNF-α, IL-1β ak IL-6; (B) nivo pwoteyin kolonik TNF-α, IL-1β ak IL-6. Done yo prezante kòm mwayèn ± SEM (n = 4-6). #p < 0.05 oubyen ##p < 0.01 oubyen ###p < 0.001 vs gwoup kontwòl (Con); *p < 0.05 oubyen **p < 0.01 vs gwoup DSS.
Disbyoz entestinal enpòtan anpil nan patogenez UC a.24 Pou envestige si BLG module mikwobyota entesten sourit trete ak DSS, yo te fè sekans 16S rRNA pou analize kominote bakteri ki nan kontni entesten an. Dyagram Venn lan montre ke twa gwoup yo pataje 385 OTU. An menm tan, chak gwoup te gen OTU inik (Fig. 3A). Anplis de sa, endèks Chao1 ak endèks Shannon ki montre nan Figi 3B ak C te montre ke divèsite kominote mikwobyota entesten an te redwi nan sourit trete ak BLG, paske endèks Shannon an te diminye anpil nan gwoup trete ak BLG a. Analiz konpozan prensipal (PCA) ak analiz kowòdone prensipal (PCoA) yo te itilize pou detèmine modèl gwoupman pami twa gwoup yo epi yo te montre ke estrikti kominote sourit trete ak DSS yo te separe klèman apre tretman BLG (Figi 3D ak E). Done sa yo sijere ke tretman BLG te afekte anpil estrikti kominote sourit ki gen kolit pwovoke pa DSS.
Figi 3 BLG modifye divèsite mikwobyota entesten an nan sourit ki gen kolit pwovoke pa DSS. (A) Dyagram Venn nan OTU, (B) Endèks Chao1, (C) Endèks richès Shannon, (D) Graf nòt Analiz Konpozan Prensipal (PCA) nan OTU, (E) Figi nòt Analiz Kowòdone Prensipal OTU (PCoA). Done yo prezante kòm mwayèn ± SEM (n = 6). **p < 0.01 vs gwoup DSS.
Pou evalye chanjman espesifik nan mikwobyota fekal la, nou te analize konpozisyon mikwobyota entesten an nan tout nivo taksonomik yo. Jan yo montre nan Figi 4A, prensipal filòm yo nan tout gwoup yo se te Firmicutes ak Bacteroidetes, ki te swiv pa Verrucomicrobia. Abondans relatif Firmicutes ak rapò Firmicutes/Bacteroidetes yo te ogmante anpil nan kominote mikwòb fekal sourit trete ak DSS yo konpare ak sourit kontwòl yo, epi chanjman sa yo te ranvèse anpil apre tretman BLG. An patikilye, tretman BLG a te ogmante anpil abondans relatif Verrucobacterium nan poupou sourit ki gen kolit pwovoke pa DSS. Nan nivo kay la, kominote mikwòb fekal yo te okipe pa Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae ak Prevotellaceae (Fig. 4B). Konpare ak gwoup DSS la, rediksyon BLG a te ogmante abondans Akkermansiaceae, men li te diminye abondans Lachnospiraceae ak Ruminococcaceae. Li enpòtan pou note, nan nivo genus la, kominote fekal la... Mikwobyota a te okipe pa Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia ak Prevotellaceae_UCG-001 (Fig. 4C). Rezilta sa a te demontre tou ke tretman BLG a te efektivman ranvèse dezekilib mikwobyota a an repons a defi DSS, karakterize pa yon diminisyon nan Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas ak Oscillibacter, ak yon ogmantasyon nan Akkermansia ak Prevotellaceae_UCG-001.
Figi 4 BLG modifye abondans mikwobyota entesten nan sourit ki gen kolit pwovoke pa DSS. (A) Abondans mikwobyota entesten nan nivo filòm lan; (B) Abondans mikwobyota entesten nan nivo fanmi an; (C) Abondans mikwobyota entesten nan nivo genus la. Done yo prezante kòm mwayèn ± SEM (n = 6). #p < 0.05 oubyen ###p < 0.001 vs gwoup kontwòl (Con); *p < 0.05 oubyen **p < 0.01 oubyen ***p < 0.001 vs gwoup DSS.
Si nou konsidere ke asid gra chèn kout (SCFA) yo se metabolit prensipal Akkermansia ak Prevotellaceae_UCG-001 yo, alòske asetat, propionate ak butirat se SCFA ki pi abondan nan lumen entesten an, 25-27 nou toujou nan etid nou an. Jan yo montre nan Figi 5, konsantrasyon asetat, propionate ak butirat fekal yo te siyifikativman redwi nan gwoup ki te trete ak DSS la, alòske tretman BLG a te kapab siprime rediksyon sa a an gwo pati.
Figi 5. BLG ogmante nivo SCFA nan poupou sourit ki gen kolit pwovoke pa DSS. (A) Kontni asid asetik nan poupou; (B) kontni asid propionik nan poupou; (C) kontni asid butirik nan poupou. Done yo prezante kòm mwayèn ± SEM (n = 6). #p < 0.05 oubyen ##p < 0.01 vs gwoup kontwòl (Con); *p < 0.05 oubyen **p < 0.01 vs gwoup DSS.
Nou te kalkile plis koyefisyan korelasyon Pearson ant SCFA diferansyèl nan nivo genus la ak mikwobyota fekal la. Jan yo montre nan Figi 6, Akkermansia te gen yon korelasyon pozitiv ak pwodiksyon asid propionik (Pearson = 0.4866) ak asid butirik (Pearson = 0.6192). Okontrè, tou de Enteromonas ak Oscillobacter te gen yon asosye negatif ak pwodiksyon asetat, ak koyefisyan Pearson 0.4709 ak 0.5104, respektivman. Menm jan an tou, Ruminococcaceae_UCG-014 te gen yon korelasyon negatif ak pwodiksyon asid propionik (Pearson = 0.4508) ak asid butirik (Pearson = 0.5842), respektivman.
Figi 6 Analiz korelasyon Pearson ant SCFA diferansyèl ak mikwòb kolonik yo. (A) Enteromonas ak asid asetik; (B) Basil chòk ak asid asetik; (C) Akkermansia vs asid propionik; (D) Ruminococcus_UCG-014 ak asid propionik; (E) Akkermansia ak asid butirik; (F) Ruminococcus _UCG-014 ak asid butirik.
Peptid-1 ki sanble ak glikagon (GLP-1) se yon pwodui pòs-tradiksyon espesifik pou kalite selil nan proglikagon (Gcg) ki gen pwopriyete anti-enflamatwa.28 Jan yo montre nan Figi 7, DSS te pwovoke yon diminisyon siyifikatif nan ekspresyon mRNA Gcg. Tretman kolon ak BLG te kapab ranvèse rediksyon Gcg pwovoke pa DSS la yon fason siyifikatif konpare ak gwoup kontwòl la (Fig. 7A). An menm tan, nivo GLP-1 nan serom nan te siyifikativman redwi nan gwoup trete ak DSS la, epi tretman BLG te kapab anpeche rediksyon sa a anpil (Fig. 7B). Piske asid gra chèn kout yo ka estimile sekresyon GLP-1 atravè aktivasyon reseptè 43 ki makonnen ak pwoteyin G (GRP43) ak reseptè 41 ki makonnen ak pwoteyin G (GRP41), nou te egzamine tou GPR41 ak GRP43 nan kolon sourit kolit yo epi nou te jwenn ke ekspresyon mRNA kolonik GRP43 ak GPR41 te siyifikativman diminye apre defi DSS, epi tretman BLG te kapab efektivman sove diminisyon sa yo (Figi 7C ak D).
Figi 7 BLG ogmante nivo GLP-1 nan sewòm ak ekspresyon mRNA Gcg, GPR41 ak GRP43 nan kolon nan sourit trete ak DSS. (A) Ekspresyon mRNA Gcg nan tisi kolon; (B) Nivo GLP-1 nan sewòm; (C) Ekspresyon mRNA GPR41 nan tisi kolon; (D) Ekspresyon mRNA GPR43 nan tisi kolon. Done yo prezante kòm mwayèn ± SEM (n = 5-6). #p < 0.05 oswa ##p < 0.01 vs gwoup kontwòl (Con); *p < 0.05 vs gwoup DSS.
Piske tretman BLG a te kapab ogmante nivo GLP-1 nan sewòm, ekspresyon mRNA Gcg nan kolon an, ak nivo SCFA fekal nan sourit trete ak DSS, nou te egzamine plis asetat, propionat, ak butirat ansanm ak sourit kontwòl (F-Con), DSS kolit (F-Con) -DSS) ak sourit trete ak kolit (F-BLG) sou liberasyon GLP-1 nan selil epitelyal kolonik murin prensipal yo. Jan yo montre nan Figi 8A, selil epitelyal kolonik murin prensipal trete ak 2 mM asid asetik, asid propionik, ak asid butirik, respektivman, te siyifikativman estimile liberasyon GLP-1, ki konsistan avèk etid anvan yo.29,30 Menm jan an tou, tout F-Con, F-DSS, ak F-BLG (ekivalan a 0.25 g poupou) te anpil estimile liberasyon GLP-1 nan selil epitelyal kolonik murin prensipal yo. Notalman, kantite GLP-1 ki te libere pa selil epitelyal kolonik murin prensipal trete ak F-DSS te pi ba pase sa ki nan selil epitelyal kolonik murin prensipal trete ak F-Con ak F-BLG. selil epitelyal kolonik sourit yo (Figi 8B). Done sa yo sijere ke tretman BLG a te retabli pwodiksyon GLP-1 ki sòti nan SCFA entesten an yon fason siyifikatif.
Figi 8 SCFA ki sòti nan BLG a stimul liberasyon GLP-1 nan selil epitelyal kolonik murin prensipal yo. (A) Asid asetik, asid propionik, ak asid butirik te stimul liberasyon GLP-1 nan selil epitelyal kolonik murin prensipal yo; (B) ekstrè fekal F-Con, F-DSS ak F-BLG te stimul selil epitelyal kolonik murin prensipal yo Kantite GLP-1 ki libere. Alikòt selil epitelyal kolonik yo te mete nan asyèt Petri ki gen fon an vè epi trete yo ak 2 mM asid asetik, asid propionik, asid butirik, ak ekstrè fekal F-Con, F-DSS, ak F-BLG (ekivalan a 0.25 g poupou), respektivman. 2 èdtan nan 37°C, 5% CO2, respektivman. Yo te detekte kantite GLP-1 ki te libere nan selil epitelyal kolonik murin prensipal yo pa ELISA. Done yo prezante kòm mwayèn ± SEM (n = 3).#p < 0.05 oubyen ##p < 0.01 vs. vid oubyen F-Con; *p < 0.05 vs. F-DSS.
Abrevyasyon: As, asid asetik; Pro, asid propionik; sepandan, asid butirik; F-Con, ekstrè fekal ki soti nan sourit kontwòl; F-DSS, ekstrè fekal ki soti nan sourit kolit; F-BLG, ki soti nan kolon trete ak BLG. Ekstrè fekal sourit ki gen enflamasyon.
Òganizasyon Mondyal Lasante a klase ulcero-kubital kòm yon maladi refraktè, li ap vin tounen yon danje mondyal; Sepandan, metòd efikas pou predi, anpeche, ak trete maladi a toujou limite. Se poutèt sa, gen yon bezwen ijan pou eksplore ak devlope nouvo estrateji terapetik ki an sekirite epi efikas pou ulceroz kolit (UC). Preparasyon medikaman tradisyonèl Chinwa yo se yon opsyon pwomèt paske anpil preparasyon medikaman tradisyonèl Chinwa yo te montre yo efikas nan tretman UC nan popilasyon Chinwa a pandan plizyè syèk, epi yo tout se byolojik òganik ak materyèl natirèl ki sitou pa danjere pou moun ak bèt.31,32 Etid sa a te vize pou chèche yon preparasyon medikaman tradisyonèl Chinwa ki an sekirite epi efikas pou tretman UC epi pou eksplore mekanis aksyon li. BLG se yon fòmil èrbal Chinwa byen koni ki itilize pou trete grip la.8,33 Travay nan laboratwa nou an ak lòt moun te montre ke endigo, yon pwodwi medikaman tradisyonèl Chinwa trete ki soti nan menm matyè premyè ak BLG, montre efikasite siyifikatif nan tretman UC nan moun ak bèt.4,34 Sepandan, efè anti-kolit BLG ak efè li yo Mekanis lan pa klè. Nan etid aktyèl la, rezilta nou yo demontre ke BLG efektivman diminye enflamasyon kolonik ki pwovoke pa DSS, ki asosye ak modilasyon mikwobyota entesten an ak restorasyon pwodiksyon GLP-1 ki sòti nan trip la.
Li byen koni ke KU karakterize pa peryòd rechit ak karakteristik klinik tipik, tankou pèdi pwa, dyare, senyen nan rèktòm, ak domaj mikez kolonik anpil.35 Kidonk, yo te administre kolit kwonik rechit lè yo te bay twa sik 1.8% DSS pandan senk jou, epi apre sa yo te bwè sèt jou dlo. Jan yo montre nan Figi 1B, pèt pwa ki varye ak nòt DAI yo te endike yon endiksyon siksè nan kolit kwonik rechit. Sourit nan gwoup trete ak BLG yo te montre yon rekiperasyon ki ogmante apati 8yèm jou a, ki te siyifikativman diferan de 24yèm jou a. Menm chanjman yo te obsève tou nan nòt DAI a, sa ki sijere yon amelyorasyon nan amelyorasyon klinik kolit la. An tèm de blesi kolon ak estati enflamatwa, longè kolon, domaj tisi kolon, ak ekspresyon jèn ak pwodiksyon sitokin proenflamatwa TNF-α, IL-1β, ak IL-6 nan tisi kolon yo te amelyore anpil tou apre tretman BLG. Ansanm, rezilta sa yo demontre klèman ke BLG efikas nan tretman kolit kwonik rechit nan sourit.
Kijan BLG egzèse efè famakolojik li yo? Anpil etid anvan yo te montre ke mikwobyota entesten an jwe yon wòl kle nan patogenez ulcero-kubital la, epi terapi ki baze sou mikwobyoma ak mikwobyoma ki vize yo te parèt kòm yon estrateji trè atiran pou tretman ulcero-kubital la. Nan etid sa a, nou demontre ke tretman BLG a lakòz chanjman enpòtan nan konpozisyon mikwobyota entesten an, ki sijere ke efè pwoteksyon BLG kont kolit pwovoke pa DSS gen rapò ak modilasyon mikwobyota entesten an. Obsèvasyon sa a konsistan avèk nosyon ke reprogramasyon omeyostazi mikwobyota entesten an se yon apwòch enpòtan pou konprann efikasite preparasyon TCM yo.36,37 Li enpòtan pou note ke Akkermansia se yon bakteri Gram-negatif ak estrikteman anaerobik ki viv nan kouch mikis trip la, ki degrade misin, pwodui asid propionik, estimile diferansyasyon selil kalicin, epi kenbe fonksyon entegrite baryè mukoza a.26 Plizyè done klinik ak sou bèt sijere ke Akkermansia trè asosye avèk mukoza ki an sante,38 ak administrasyon oral Akkermansia spp. ka amelyore enflamasyon mikez la anpil.39 Done aktyèl nou yo sijere ke abondans relatif Akkermansia a ogmante anpil apre tretman BLG. Anplis de sa, Prevotellaceae_UCG-001 se yon bakteri ki pwodui SCFA.27 Plizyè etid te montre ke yo te jwenn Prevotellaceae_UCG-001 nan yon abondans relatif ki ba nan poupou bèt ki gen kolit.40,41 Done aktyèl nou yo montre tou ke tretman BLG ka ogmante anpil abondans relatif Prevotellaceae_UCG-001 nan kolon sourit trete ak DSS yo. Okontrè, Oscillibacter se yon bakteri mezofil, estrikteman anaerobik.42 rapòte ke abondans relatif Oscillibacter te ogmante anpil nan sourit UC epi li te korele pozitivman anpil ak nivo IL-6 ak IL-1β ak nòt patolojik yo.43,44 Li enpòtan pou note ke tretman BLG a te redwi anpil abondans relatif Oscillibacter nan poupou sourit trete ak DSS yo. Li enpòtan pou note ke bakteri sa yo ki modifye ak BLG te bakteri ki pwodui plis SCFA yo. Anpil etid anvan yo te demontre potansyèl benefik yo efè SCFA yo sou enflamasyon kolonik ak pwoteksyon entegrite epitelyal entesten an.45,46 Done nou yo kounye a obsève tou ke konsantrasyon asetat SCFA, propionate, ak butirat nan poupou trete ak DSS yo te ogmante anpil nan sourit trete ak BLG. Lè nou mete tout ansanm, rezilta sa yo demontre klèman ke tretman BLG ka amelyore bakteri ki pwodui SCFA pwovoke pa DSS nan sourit ki gen kolit kwonik rechitan.
GLP-1 se yon enkretin ki pwodui sitou nan ileon an ak kolon an epi li jwe yon wòl enpòtan nan reta vid gastrik la ak bese glikoz nan san apre repa.47 Prèv yo sijere ke dipeptidil peptidaz (DPP)-4, yon agonist reseptè GLP-1, ak yon nanomedikaman GLP-1 ka efektivman soulaje enflamasyon entesten nan sourit yo.48-51 Jan yo te rapòte nan etid anvan yo, konsantrasyon SCFA ki wo yo te asosye avèk nivo GLP-1 nan plasma nan moun ak sourit yo. 52 Done aktyèl nou yo montre ke apre tretman BLG, nivo GLP-1 nan serom ak ekspresyon mRNA Gcg te ogmante anpil. Menm jan an tou, sekresyon GLP-1 te ogmante anpil nan kilti kolon apre estimilasyon ak ekstrè fekal ki soti nan sourit kolit trete ak BLG konpare ak estimilasyon ak ekstrè fekal ki soti nan sourit kolit trete ak DSS. Kijan SCFA yo afekte liberasyon GLP-1? Gwen Tolhurst et al. rapòte ke SCFA ka estimile sekresyon GLP-1 atravè GRP43 ak GPR41.29 Done nou yo montre tou ke tretman BLG ogmante anpil ekspresyon mRNA GRP43 ak GPR41 nan kolon sourit trete ak DSS. Done sa yo sijere ke tretman BLG ka retabli pwodiksyon GLP-1 ankouraje pa SCFA lè li aktive GRP43 ak GPR41.
BLG se yon medikaman san preskripsyon (OTC) alontèm nan Lachin. Dòz maksimòm BLG ki tolere nan sourit Kunming se 80g/Kg, epi pa gen okenn toksisite egi ki te obsève.53 Kounye a, dòz BLG (san sik) rekòmande nan moun se 9-15 g/jou (3 fwa pa jou). Etid nou an te montre ke BLG nan 1g/Kg te amelyore kolit kwonik rekiran pwovoke pa DSS nan sourit. Dòz sa a pre dòz BLG ki itilize klinikman. Etid nou an te jwenn tou ke mekanis aksyon li medyatè, omwen an pati, pa modifikasyon nan mikwobyota entesten an, espesyalman bakteri ki pwodui SCFA, tankou Akkermansia ak Prevotellaceae_UCG-001, pou retabli pwodiksyon GLP-1 ki sòti nan trip la. Rezilta sa yo sijere ke BLG merite plis konsiderasyon kòm yon ajan terapetik potansyèl pou tretman kolit klinik. Sepandan, mekanis egzak ke li itilize pou module mikwobyota entesten an rete pou konfime pa sourit ki defisyan nan mikwobyota ak transplantasyon bakteri fekal.
As, asid asetik; men, asid butirik; BLG, pandan; DSS, dekstran silfat sodyòm; DAI, endèks aktivite maladi; DPP, dipeptidil peptidaz; FID, detektè iyonizasyon flanm; F-Con, kontwòl Ekstrè fekal sourit; F-DSS, ekstrè fekal sourit kolit DSS; F-BLG, ekstrè fekal sourit kolit trete ak BLG; GLP-1, peptide-1 ki sanble ak glikagon; Gcg, glikagon; kwomatografi gaz, kwomatografi gaz; GRP43, reseptè 43 ki makonnen ak pwoteyin G; GRP41, reseptè 41 ki makonnen ak pwoteyin G; H&E, ematoksilin-eozin; HBSS, Solisyon Sale Balanse Hanks; OTC, OTC; PCA, analiz konpozan prensipal; PCoA, analiz kowòdone prensipal; Pro, asid propionik; SASP, sulfasalazin; SCFA, asid gra chèn kout; medikaman Chinwa, medikaman tradisyonèl Chinwa; UC, kolit ilsèratif.
Tout pwotokòl eksperimantal yo te apwouve pa Komite Etik Animal nan Sant Medikal Syans ak Teknoloji Inivèsite Pekin Shenzhen-Hong Kong (Shenzhen, Lachin) dapre Gid Enstitisyonèl yo ak Règleman Animal yo (nimewo etik A2020157).
Tout otè yo te fè kontribisyon enpòtan nan konsepsyon ak konsepsyon, akizisyon done, oubyen analiz ak entèpretasyon done; yo te patisipe nan redaksyon atik la oubyen nan revizyon kritik kontni entelektyèl enpòtan; yo te dakò pou soumèt maniskri a nan jounal aktyèl la; finalman yo te apwouve vèsyon an pou piblikasyon; yo te responsab tout aspè travay la.
Travay sa a te resevwa sipò nan men Fondasyon Nasyonal Syans Natirèl Lachin nan (81560676 ak 81660479), pwojè premye klas Inivèsite Shenzhen an (86000000210), Fon Komite Inovasyon Syans ak Teknoloji Shenzhen an (JCYJ20210324093810026), Fon Rechèch Syans ak Teknoloji Medikal Pwovens Guangdong lan (A2020157 ak A2020272), Famasi Inivèsite Medikal Guizhou nan Pwovens Guizhou finanse pa Laboratwa Key (YWZJ2020-01) ak Lopital Inivèsite Peking Shenzhen an (JCYJ2018009).
1. Tang B, Zhu J, Zhang B, et al. Potansyèl terapetik triptolid kòm yon ajan anti-enflamatwa nan kolit eksperimantal pwovoke pa dekstran silfat sodyòm nan sourit. pre-immune. 2020;11:592084. doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. Kaplan GG. Chay mondyal maladi enflamatwa entesten (MII): soti 2015 rive 2025. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2015;12:720–727. doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. Peng J, Zheng TT, Li Xue, et al. Alkaloid ki sòti nan plant: modifikatè maladi pwomèt nan maladi enflamatwa entesten. Prepharmacology. 2019;10:351. doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. Xiao Haiteng, Peng Jie, Wen B, et al. Indigo Naturalis anpeche estrès oksidatif kolonik ak repons Th1/Th17 nan kolit pwovoke pa DSS nan sourit. Oxid Med Cell Longev. 2019;2019:9480945. doi: 10.1155/2019/9480945
5. Chen M, Ding Y, Tong Z. Efikasite ak sekirite Sophora flavescens (Sophora flavescens) medikaman èrbal Chinwa nan tretman kolit ilsèratif: prèv klinik ak mekanis potansyèl yo.Prepharmacology.2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Cao Fang, Liu Jie, Sha Benxing, Pan HF. Pwodwi natirèl: medikaman efikas eksperimantalman pou tretman maladi enflamatwa entesten. Curr Pharmaceuticals. 2019;25:4893–4913. doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. Zhang C, Jiang M, Lu A. Refleksyon sou tretman adjuvan kolit ilsèratif ak medikaman tradisyonèl Chinwa. Clinical Rev Allergy Immunization. 2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Li Zhongteng, Li Li, Chen TT, et al. Efikasite ak sekirite granul Banlangen nan tretman grip sezon an: yon pwotokòl etid pou yon esè kontwole owaza. trial. 2015; 16: 126. doi: 10.1186 / s13063-015-0645-x